Extracto vegetal y controladores biológicos para el control de Penicillium digitatum aislado de frutos de mandarina resistentes al Imazalil

Abstract

El control del moho verde producido por Penicillium digitatum en las plantas de empaque de cítricos de Perú se basa principalmente en el fungicida imazalil (IMZ). Esto ha incrementado las poblaciones de biotipos resistentes del patógeno. El objetivo del presente trabajo fue evaluar la resistencia de 15 aislamientos de P. digitatum al IMZ. Para ello se utilizaron tres filtros de resistencia para llegar al aislamiento más resistente. La recolección de aislamientos se dio en frutos de mandarina W. Murcott y Nova con presencia de la enfermedad y eliminados en la empacadora. El primer filtro consistió en evaluar 15 aislamientos por su nivel de resistencia a 1, 2 y 5ppm de imazalil (PDA+IMZ). Catorce sobrevivieron a 5ppm y se consideraron altamente resistentes. El segundo filtro consistió en comparar la velocidad de infección en frutos de mandarina. Frutos de W. Murcott fueron inoculados con los 14 aislamientos de P. digitatum resistentes. Previamente los frutos fueron desinfestados por inmersión durante 60s con hipoclorito de sodio al 1%. Se contabilizó la severidad luego de 15 días a 20 ± 2 ºC midiendo el diámetro de la esporulación y podredumbre. Los más altos porcentajes de severidad fueron de tres aislamientos que se sometieron al último filtro que consistió en evaluar la germinación de conidias. Para ello, se realizó una suspensión de conidias hasta 106 conidias/ml y fueron llevados a portaobjetos con 1 gota de PDA la cual se conservó a 25°C. Hubo solo un aislamiento que fue significativamente superior al resto de los aislamientos y cuyo porcentaje de germinación fue de 97.5% a las 22 horas del montaje. A este último se le consideró el asilamiento más resistente al IMZ. Se dio paso a ensayos de control de la cepa más virulenta de P. digitatum al IMZ en condiciones in vitro e in vivo con los productos “Impala” (Imz), “Timorex Gold” (Aceite esencial de té de Melaleuca alternifolia), “Serenade” (Bacillus subtilis) y “Tricho D”. Se determinó que el mejor tratamiento para el control in vitro fue el Imazalil a 500 ppm, seguido de Serenade con un porcentaje de control del 88% y Timorex Gold con un 61%; y el mejor tratamiento para el control in vivo fue el Timorex Gold que retrasó el avance del moho con un control del 35% de la esporulación en el 6to día y con un 45% de control de la pudrición en el 8vo. Se abre paso a ensayos de control utilizando el Timorex Gold (té de Melaleuca alternifolia) como métodos alternativos que favorezcan un manejo anti-resistencia

Postharvest control of green mold produced by Penicillium digitatum in citrus packing houses in Peru is mainly based on the use of imazalil fungicide (IMZ). This has increased populations of resistant biotypes of the pathogen. The objective of this work was to evaluate the resistance of 15 isolates of P. digitatum to IMZ following three steps. Isolates were collected from W. Murcott and Nova mandarin fruits with the presence of the disease eliminated during packing activities. First step consisted to evaluate 15 isolates for their resistance level, at 1, 2 and 5ppm of imazalil (PDA + IMZ). Fourteen survived to 5ppm and were considered highly resistant. Second step consisted to compare the infection speed on W. Murcott fruits. Fruits were previously clean by immersion for 60 seconds in a solution with 1 % of sodium hypochlorite before being infested with the 14 imazalil-resistant P. digitatum isolates. Severity was graded after 15 days at 20 ± 2 ºC, measuring the ratio of the sporulation and rotting. Three isolates showed the highest percentages of severity and followed the third step that consisted in evaluate conidia germination. Conidial suspension of the three isolates was carried out until 200 conidia were observed per visual field and then they were taken to slides with 1 drop of PDA which were kept at 25 ºC. Only one isolate was significantly higher than the other two isolates whose percentage of germination was 97.5% after 22 hours of assembly. This isolate was considered the most resistant isolation to IMZ. Control trials of the most virulent isolation of P. digitatum to IMZ under in vitro and in vivo conditions with the products "Impala" (Imz), "Timorex Gold" (Melaleuca alternifolia tea), "Serenade” (Bacillus subtilis) and “Tricho D” (Trichoderma harzianum). It was determined that the best treatment for in vitro control was Imazalil at 500 ppm, followed by Serenade with a control percentage of 88% and Timorex Gold with 61%; and the best treatment for in vivo control was Timorex that delayed mold growth with 35% control of sporulation on the 6th day and with 45% rot control in the 8th. It opens the way to control trials using Timorex Gold (Melaleuca alternifolia tea) as an alternative method that favors anti-resistance management